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    SDS-PAGE凝膠制備試劑盒

    價格: 在線咨詢
    貨號:
    S0921K56
    產品規格:
    50T
    購買數量:
    在線咨詢 400-1016-218
    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品簡介

    本產品SDS-PAGE凝膠制備試劑盒包含凝膠制備所需的所有試劑,用戶只需準備少量純水及制膠設備(制膠底座、玻璃板、梳子等),根據說明書操作即可制得所需凝膠。本試劑盒可制備常規大小凝膠至少50塊。


    儲存與運輸

    冰袋(wet ice)運輸;4℃避光保存,有效期12個月。



    使用方法

    1. 根據目的蛋白分子量和所選電泳緩沖液不同,選擇合適濃度的SDS-PAGE下層膠,參照表格如下:

    SDS-PAGE分離膠濃度

    最佳分離范圍(kDa)

    (Tris-Glycine電泳緩沖液)

    最佳分離范圍(kDa)

    (SWE快速高分辨電泳緩沖液)

    6%

    50-300

    15-300

    8%

    30-130

    10-250

    10%

    20-100

    5-150

    12%

    10-60

    3-100

    15%

    <40

    <60

    2.  根據目標蛋白分子量大小,選取分離膠的濃度,以常用規格8.3 cm×7.3 cm凝膠板(單塊)為例,可參考下表配制制膠液:

    分離膠濃度(%) 6% 8% 10% 12% 15%
    玻璃板厚度 0.75 mm 1.0 mm 1.5 mm 0.75 mm 1.0 mm 1.5 mm 0.75 mm 1.0 mm 1.5 mm 0.75 mm 1.0 mm 1.5 mm 0.75 mm 1.0 mm 1.5 mm
    所需制膠液總體積*(mL) 4.0  6.0  8.0  4.0  6.0  8.0  4.0  6.0  8.0  4.0  6.0  8.0  4.0  6.0  8.0 
    H2O(mL) 2.12  3.18  4.24  1.85 2.78 3.7 1.59 2.38 3.17 1.32 1.98 2.64 0.92 1.38 1.84
    30% 丙烯酰胺(29:1)(mL) 0.8  1.2  1.6  1.07 1.6 2.14 1.33 2.0  2.67 1.6 2.4 3.2 2.0  3.0  4.0 
    1.5 M Tris-HCl(pH 8.8)(mL) 1.0  1.5  2.0  1.0  1.5  2.0  1.0  1.5  2.0  1.0  1.5  2.0  1.0  1.5  2.0 
    10% SDS(μL) 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80
    10% AP(過硫酸銨)μL 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80
    TEMED(μL) 2.0  3.0  4.0  2.0  3.0  4.0  2.0  3.0  4.0  2.0  3.0  4.0  2.0  3.0  4.0 

    *制膠液總體積不包含TEMED的體積。


    3. 濃縮膠配制可參考下表:

    濃縮膠濃度(%)

    5%

    H2O(mL)

    1.93

    2.95

    3.86

    5.79

    30% 丙烯酰胺(29:1)(mL)

    0.5

    0.75

    1.0

    1.5

    1.0M Tris-HCl(pH 6.8)(mL)

    0.5

    0.75

    1.0

    1.5

    10% SDS(μL)

    40

    60

    80

    120

    10% AP(過硫酸銨)(μL)

    30

    45

    60

    90

    TEMED(μL)

    4

    6

    8

    12

    總體積*mL

    3

    4.5

    6.0

    9.0

    *總體積不包含TEMED的體積。


    4. 推薦電泳條件:

    a. 使用SWE快速高分辨電泳緩沖液進行電泳:200-250 V恒壓,25-35 min可完成電泳;

    b. 使用Tris-Glycine電泳緩沖液進行電泳:上層膠設置電壓90 V,電泳約30 min(marker進入分離膠);下層膠調整電壓為150-180 V,約60-90 min(可根據實際情況調整)。


    注意事項

    1. 所有試劑使用前需要提前復溫至室溫后方可使用。

    2. AP(過硫酸銨)用純水配制成10%濃度,即每支180 mg AP(過硫酸銨)管中加入1800 μL純水溶解。配制成溶液的AP建議分裝成小份后-20℃保存,有效期3個月;如放4℃保存,有效期1周。

    3. 小于10 kDa的蛋白分離建議使用Tricine膠,丙烯酰胺凝膠可能不足以分離。

    4. 溫度對于膠的凝固時間會有影響,一般溫度越低,凝固時間越長;溫度越高凝膠越快。

    5. 凝膠需要充分的凝固時間,建議膠制好充分靜置確保凝膠徹底。

    6. 當溫度較低時,10%SDS溶液有結晶析出,于37℃復溫融化后可繼續使用。

    7. 如需快速制膠試劑,可購買本公司其他產品,如SDS-PAGE凝膠快速制備試劑盒,或超快速彩色凝膠配制試劑盒系列,及高分辨超快速彩色凝膠配制試劑盒系列,可滿足不同實驗需求。

    8. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    本產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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