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    考馬斯亮藍G250

    價格: 在線咨詢
    貨號:
    S0921K47
    產品規格:
    250ml
    購買數量:
    在線咨詢 400-1016-218
    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品簡介

    考馬斯亮藍G250能與蛋白質快速結合??捡R斯亮藍G250在游離狀態下呈紅色,最大光吸收在488 nm,其與蛋白質結合后在595 nm處有最大吸收值,并且光吸收值與蛋白質含量成正比,因此可用于蛋白質的定量檢測。


    儲存與運輸

    常溫保存與運輸,有效期12個月。


    使用方法

    1. (可選)繪制標準曲線(酶標儀法):將BSA用水溶解配制0.5 mg/mL的蛋白標準工作液。將蛋白標準工作液分別按0,1,2,4,8,12,16,20 μL加到96孔板中,然后用PBS或生理鹽水依次加20,19,18,16,12,8,4,0 μL將上述梯度工作液補足到20 μL。得到蛋白濃度依次為0,25,50,100,200,300,400,500 μg/mL的梯度曲線。如只是做相對定量比較,則無需繪制標準曲線。

    2. 準備待測樣品:將待測的蛋白樣品進行適當稀釋(可通過預實驗檢測,使樣品蛋白濃度在標準曲線范圍內,確保檢測結果可信),按照每個樣品20 μL的量加到96孔板中。待測樣品稀釋需與蛋白標準品用相同溶液。

    3. 檢測:向以上每孔加入200 μL考馬斯亮藍G250溶液充分混勻(可將96孔板放在振蕩器上振蕩30 s),室溫放置3-5 min后,以標準曲線0號做參比,在595 nm波長下比色測定,記錄各孔吸光度值。

    4. 計算:以標準曲線中梯度蛋白含量(μg/mL)為橫坐標,吸光值為縱坐標,繪出標準曲線。根據所測樣品的吸光值,在標準曲線上即可查得相應孔中待測樣品的蛋白濃度(μg/mL),再乘以樣品稀釋倍數即為待測樣品實際蛋白濃度。

    另:如用分光光度計測定,則用玻璃試管或玻璃比色管為反應容器制作標準曲線。待測蛋白樣品做適當稀釋后,加入到新的玻璃試管或比色管中,樣品量為1 mL。向標準曲線梯度管及樣品管中各加入考馬斯亮藍G250溶液3 mL,充分混勻,室溫靜置3-5 min后用分光光度計進行比色檢測。

    檢測時分光光度計波長設置595 nm,以標準曲線0號管為參比調零,檢測標準曲線及待測樣品。按照步驟4的方法繪制標準曲線及計算待測樣品中的蛋白濃度。


    注意事項

    1. 本產品使用前需恢復至室溫,并顛倒混勻,以免影響檢測的靈敏度。

    2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    本產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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