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    0.25%胰蛋白酶消化液(含EDTA,含酚紅)

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    貨號:
    FKU0151
    產品規格:
    100ml
    購買數量:
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    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品簡介

    胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養,以及體外細胞培養過程中,均會使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細胞間蛋白質,使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃ pH 8.0條件下消化能力最強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑,溶液偏堿性時呈紫紅色,偏酸性時呈橘紅色,近中性時呈粉紅色。

    本產品為0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s緩沖液,添加0.9 mM EDTA,含酚紅指示劑,經0.22 μm過濾除菌。


    儲存與運輸

    干冰(dry ice)運輸;-20℃保存,有效期12個月。避免反復凍融。


    操作說明

    貼壁細胞

    1. 吸去細胞培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞去除殘余的血清。

    2. 加入適量本產品覆蓋細胞,室溫靜置消化1-5 min。

    3. 顯微鏡下觀察,當細胞出現明顯收縮,用移液槍輕輕吹打細胞較容易將細胞吹打下來時,吸除胰酶細胞消化液,加入含血清的細胞培養液,輕輕吹打下細胞,制成細胞懸液,即可直接傳代培養。如果用移液槍輕輕吹打時很難使細胞從板底脫落,表明消化時間不夠,可加入胰酶細胞消化液重新消化。切忌避免過度消化。


    注意事項

    1. 由于組織或細胞性質不同,實驗人員應依據具體情況,確定最佳消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況。

    2. 本產品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染。

    3. 本產品不宜4℃長期保存,避免反復凍融,建議分裝成小份后-20℃保存。

    4. 對于胰酶中EDTA、酚紅的選擇,可以根據實驗需要,對于一般的腫瘤細胞,選擇含EDTA的胰酶消化液。對于較敏感、脆弱的細胞,例如原代細胞及很容易消化的細胞,選擇不含EDTA的胰酶消化液,如果細胞特別敏感,需要選擇胰蛋白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細胞儀檢測細胞凋亡,則選用不含EDTA的胰酶消化液。

    5. 由于Hank’s溶液中NaHCO3含量較低,不建議將本產品用于37℃的CO2培養箱中消化,如果放入CO2相,溶液會迅速變酸性。

    6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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