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    G-418

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    貨號:
    FKU0147
    產品規格:
    1g
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    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品簡介

    G-418(Geneticin,遺傳霉素),也稱為G418,是一種氨基糖苷類抗生素,其結構與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似。G-418能通過抑制轉座子Tn601,Tn5的基因表達,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞都有毒性。

    在分子遺傳實驗中,G-418是穩定轉染最常用的抗性篩選試劑。當neo基因被整合進真核細胞DNA后,能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G-418的選擇性培養基中生長。G-418的這一選擇特性,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。


    主要參數

    分子式:C20H40N4O10·2H2SO4

    分子量:692.7

    性狀:白色或灰色粉末

    溶解性:易溶于水


    儲存與運輸

    冰袋(wet ice)運輸,-20℃保存,有效期24個月。


    使用說明

    可用PBS緩沖液溶解本產品,配制50 mg/mL或其他濃度的儲存液,過濾除菌后分裝成小份置于-20℃保存。臨用前融化均勻后稀釋至所需濃度。溶液避免反復凍融。

    篩選哺乳動物細胞,推薦起始篩選濃度為400 μg/mL。篩選植物細胞,推薦起始篩選濃度為10 μg/mL。篩選酵母,推薦起始濃度為500 μg/mL。建議根據具體篩選材料及起始濃度作用效果進行調整,確定最佳篩選濃度。

    以篩選哺乳動物細胞為例,將細胞制成懸液稀釋至1000個細胞/mL,取100μL細胞懸液加入含培養基的24孔板中,將每孔中G-418終濃度調整至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000μg/mL等梯度,每3-5天更換含G-418的篩選液,培養10-14天,以使全部細胞死亡的最低G-418濃度進行下一步篩選。此步驟僅供參考,可根據實驗試劑情況調整。


    注意事項

    為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    本產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

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