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    支原體檢測試劑盒(化學發光法)

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    貨號:
    FKU018
    產品規格:
    20T
    購買數量:
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    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品信息

    產品名稱

    產品編號

    規格

    支原體檢測試劑盒(化學發光法)

    FKU018

    20T



    產品簡介

    本支原體檢測試劑盒是利用支原體中特有酶的活性設計而成,該酶可將支原體檢測試劑中特有的底物分解同時將ADP轉換成ATP,螢光素酶在ATP存在下催化螢光素氧化發出生物螢光,可通過化學發光儀(luminometer)進行測定,以反應待檢樣品是否存在支原體污染。整個檢測過程操作簡單,只需兩個步驟,耗時約15 min。該方法靈敏度高,檢測的是真正具有生物活性的支原體,所以檢測結果比PCR方法更準確。



    儲存與運輸

    冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存,支原體檢測試劑A需避光保存;有效期12個月。

    組成

    Component Number

    Component

    G1901-20T

    G1901-1

    支原體檢測試劑A

    1 mL

    G1901-2

    支原體檢測試劑B

    1 mL

    說明書

    1份



    操作步驟

    1. 取適量(1 mL足夠)培養3-6天的細胞上清,400 g離心3 min,以去除沉淀少量漂浮細胞或碎片,取上清立即檢測,或者4℃保存在一周內檢測,或者-80℃保存半年內檢測;

    2. 將所有檢測試劑和檢測樣品均平衡至室溫,最適宜的溫度為20-25℃;

    3. 在96孔檢測板(非透明板,建議用專用96孔白板)中加入50 μL待檢測樣品、陰性對照(如無菌水或PBS);

    4. 加入50 μL支原體檢測試劑A,輕柔混勻不要產生氣泡,室溫(20-25℃)避光放置5 min。然后用具有檢測化學發光的酶標儀進行化學發光檢測,計讀數為A。(請根據儀器靈敏度適當調整相應的參數,每個孔的檢測時間一般為0.25-1 s);

    5. 加入50 μL的支原體檢測試劑B,輕柔混勻不要產生氣泡,室溫(20-25℃)避光放置10 min。然后用具有檢測化學發光的酶標儀進行化學發光檢測,計讀數為B。(注:請嚴格按照加入支原體檢測試劑B后10 min進行檢測,不應提前或延后,否則會影響結果判斷);

    6. 計算比值(Ratio)=讀值B/讀值A。

    A. 如果B/A>1.1,說明細胞培養物中存在支原體污染;

    B. 如果B/A<0.9,說明細胞培養物中沒有支原體污染;

    C. 如果B/A比值在0.9-1.1之間,建議繼續培養細胞24-48 h后,再次檢測確定是否存在支原體污染。如果B/A比值仍在0.9-1.1之間,則該細胞培養物沒有支原體污染,為支原體陰性。



    注意事項

    1. 支原體檢測試劑A中含有螢光素酶,反復凍融會逐漸使其失活,建議第一次解凍后應適當分裝保存,分裝容器需潔凈無污染。

    2. 檢測時強烈建議使用白色或者黑色不透光96孔板,使用普通透明96孔板會使得相鄰檢測孔出現干擾。

    3. 人體皮膚表面含有豐富的ATP,檢測時請帶好實驗手套、口罩,其他耗材也應潔凈、無污染,防止外源引入ATP污染。

    4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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