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    支原體檢測試劑盒(PCR法)

    價格: 在線咨詢
    貨號:
    FKU019
    產品規格:
    50T
    購買數量:
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    產品詳情 操作說明 注意事項

    產品信息

    產品名稱

    產品編號

    規格

    支原體檢測試劑盒(PCR法)

    FKU019

    50T


    產品簡介

    支原體污染會對細胞各個方面都造成不良影響,已經成為細胞培養中高度重視的問題,因此,定期進行支原體污染檢測是十分必要的。本支原體檢測試劑盒是采用PCR方法,特異性的檢測各種培養細胞生物材料(如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等)中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物是針對支原體16s rRNA序列的保守區域設計的特異性引物,可直接使用細胞培養液作為PCR模板,特異性擴增支原體DNA,搭配配套的Mycoplasma PCR Mix(2×)一小時內即可完成,本試劑盒檢測靈敏度高,可檢測低至20個拷貝的支原體。


    儲存與運輸

    冰袋(wet ice)運輸;-20℃保存,有效期12個月。


    組成

    Component Number

    Component

    G1900-50T

    G1900-1

    Mycoplasma PCR Mix(2×)

    1 mL

    G1900-2

    Mycoplasma Primer Mix

    100 μL

    G1900-3

    Positive Control

    50 μL

    G1900-4

    Mycoplasma Free Water

    1 mL

    說明書

    1份


    操作步驟

    1. 樣品準備:取適量待檢細胞培養上清于潔凈的PCR管中,利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板。血清樣本可利用Mycoplasma Free Water稀釋后,取適量樣本于潔凈的PCR管中,利用PCR儀95℃熱處理5 min后作為模板;

    2. PCR體系配制:每次實驗需設置陰性對照(將1 μL待檢樣品換成等量的Mycoplasma Free Water)與陽性對照(在1 μL待檢樣品中加入0.5 μL Positive Control后一起作為Template),實驗時戴一次性口罩與手套,謹慎操作,防止操作不當引入外源支原體污染;

    Component

    Volume

    Template

    1 μL

    Mycoplasma Primer Mix

    2 μL

    Mycoplasma PCR Mix(2×)

    10 μL

    Mycoplasma Free Water

    To 20 μL

    3. PCR程序設置

    Step

    Temperature

    Time

    Cycles

    Initial Denaturation

    98℃

    2 min

    1

    Denaturation

    98℃

    20 s

    30

    Annealing

    56℃

    25 s

    Extension

    72℃

    10 s

    Final extension

    72℃

    5 min

    1

    Hold

    4-16℃

    Forever


     

    4. 凝膠電泳:取10 μL PCR產物,使用1%瓊脂糖凝膠進行電泳檢測;

    5. 結果分析:每次實驗通過與陰性對照、陽性對照檢測結果比較確認樣品支原體污染情況,陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對照檢測結果中有條帶很有可能是PCR體系中出現污染,建議重新實驗確認結果。如有必要,也可對PCR產物進行常規測序,以確定具體的支原體種屬。


    注意事項

    1. 本試劑盒可以檢測M.orale,M.arginini,M.bovis,M.fermentans,M.gallisepticum,M.hominis,M.pirum,Ureaplasma spp,M.hyorhinis,M.pneumoniae,A.laidlawii等至少11種以上支原體污染。

    2. 所有試劑在使用前于冰上徹底解凍、混勻,使用完畢后于-20℃保存。

    3. 每次實驗必須設置陰性對照、陽性對照,實驗組建議設置樣品模板梯度。

    4. 操作時必須佩戴口罩,嚴格按照PCR操作標準,防止引入外源污染影響實驗結果。

    5. 為了確保細胞實驗的可靠性及穩定性,建議定期進行支原體污染檢測。

    6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

     

    產品僅供科研用途,不用于臨床診斷!


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