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    • 原代細胞的復蘇步驟
      原代細胞的復蘇步驟
      細胞一般儲存在液氮中,溫度達-196℃,理論上儲存時間是無限的。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。 細胞復蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細胞恢復到一般的生長狀態,今天我們來看看原代細胞的復蘇步驟。
      2020-12-10
    • 原代細胞培養過程中的常見問題
      原代細胞培養過程中的常見問題
      根據傳統定義,自組織第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞直接從組織分......
      2020-08-21
    • 原代細胞的培養方法
      原代細胞的培養方法
      原代細胞最接近和最能反映體內生長特性,適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。 原代細胞的培養,也叫初代培養,是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養,是建立細胞系的第一步,是一項基本技術。
      2020-10-09
    • Western免疫印跡(Western Blot)
      Western免疫印跡(Western Blot)
      Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。
      2021-08-31
    • CRISPR/Cas9基因敲除
      CRISPR/Cas9基因敲除
      CRISPR(clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats)是一種來自細菌降解 入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫機制。在細菌及古細菌中,CRISPR系統共分成3類,其中Ⅰ類和Ⅲ類需要多種CRISPR相關蛋白(Cas蛋白)共同發揮作......
      2021-08-31
    • 雙熒光素酶報告基因檢測
      雙熒光素酶報告基因檢測
      全基因合成miR潛在結合位點上下游~500bp(LncRNA、circRNA或mRNA的3’UTR)野生形式WT及結合位點的突變形式Mut,克隆到psiCHECK-2多克隆位點處(1640-1674)(圖1),然后與miR的mimics/NC共同轉染293T細胞測定熒光素酶讀值即可。
      2021-08-31
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